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液相色谱仪操作规程及注意事项

发布日期:2025-01-05 18:18

1.设备操作注意事项:

(1) 流动相:

流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围;

水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质;

(2) 样品:

采用过滤或离心方法处理样品,确保样品中不含固体颗粒;

用流动相或比流动相弱(若为反相柱,则极性比流动相大;若为正相柱,则极性比流动相小)的溶剂制备样品溶液,尽量用流动相制备样品液;

(3) 色谱柱:

使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书,注意适用范围,如pH值范围、流动相类型等;

使用符合要求的流动相;

使用保护柱;

如所用流动相为含盐流动相,反相色谱柱使用后,先用水或低浓度甲醇水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗;

色谱柱在不使用时,应用甲醇冲洗,取下后紧密封闭两端保存;

不要高压冲洗柱子;

不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱。

2.设备操作规程

(1)开机

打开所有电源,待自检通过;

在计算机中双击LC SOLUTION Lite 图标,进入工作站;

(2)设置仪器方法

主要为LC采集时间、泵总流速及各泵流速、检测器波长、柱温箱温度等;

设置完成后,另存方法文件,并下载至设备;

(3)基线平稳

即点击图标(仪器开/关),系统开始运行,观察检测器基线变化,,如果基线平直稳定不变,即认为接近平衡,可以调零等待。

(4)进样分析:

点击单次运行;

编辑样品参数:样品名,方法文件名,数据存储路径—数据文件名,进样量等;

点击确定后,样品进样;

当采样时间到达设定时间后,数据采集自动结束;

如果在设定的采样时间到达之前,想要停止采集,点击停止图标;

(5)数据处理

文件---打开数据文件---视图---峰表,则可以查看保留时间,峰高,峰面积等,之后用Excel做标准曲线,根据未知样品的峰面积求浓度。

(6)关机步骤:

分析结束后,更换洗液清洗流路系统(如用缓冲液,先用水清洗半小时),再有机溶剂清洗30分钟以上,最后用有机溶剂封存;

停止系统运行,在实时分析工作站中,点仪器开/关键即停止所有单元工作;

退出实时分析界面,再完全退出;

关闭单元电源开关。

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